輔酶Ⅰ NAD（H）含量檢測試劑盒

產(chǎn)品描述 輔酶Ⅰ主要分為還原型和氧化型兩種形式：氧化型輔酶 I 又稱煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）在 糖酵解（EMP）、三羧酸循環(huán)（TCA）和呼吸鏈中作為氫受體發(fā)揮著重要作用，并可通過遞氫作用形 成 NADH（還原型輔酶 I），作為氫載體在呼吸鏈中通過化學(xué)滲透偶聯(lián)的方式合成 ATP。NAD (H) 含 量和比值對糖酵解和 TCA 循環(huán)過程的評(píng)價(jià)具有重要意義，并與能量代謝、細(xì)胞抗氧化以及一些疾病 的發(fā)生密切相關(guān)。 通過酸性和堿性提取液分別提取樣品中 NAD+和 NADH，NADH 可通過 PMS 的遞氫作用，還原 氧化型噻唑藍(lán)（MTT）生成甲瓚，產(chǎn)物在 570 nm 處具有特征吸收峰；NAD+可被乙醇脫氫酶還原為 NADH，進(jìn)一步采用 MTT 還原法生成甲瓚，通過吸光值變化即可定量檢測輔酶Ⅰ NAD (H) 的含量。

輔酶Ⅰ NAD（H）含量檢測試劑盒

注意事項(xiàng) ①試劑三和試劑四配制后有效期較短，為便于試驗(yàn)安排，各附贈(zèng)一瓶作為備用，每瓶均可滿足至 少 25 個(gè)樣本的測定； ②試劑五配制后未使用完試劑應(yīng)置于 4℃保存，嚴(yán)禁-20℃保存，使用過程中試劑五應(yīng)用液需置 于冰上放置； ③2 µmol/mL NAD+標(biāo)準(zhǔn)液和 2 µmol/mL NADH 標(biāo)準(zhǔn)液配制后 4℃可保存 1 周，嚴(yán)禁-20℃保存； ④實(shí)驗(yàn)過程中吸取上清液時(shí)應(yīng)避免吸入沉淀物而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性； ⑤反應(yīng)時(shí)間對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有較大影響建議精確控制，測定樣本較多時(shí)建議分批進(jìn)行測定，以避免組 內(nèi)反應(yīng)時(shí)間不一致對結(jié)果造成影響； ⑥反應(yīng)體系中試劑不能按比例配制為混合液使用，必須按反應(yīng)體系順序依次加入； ⑦若 A 測定大于 1.0，建議將待測樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ⑧為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測定前請仔細(xì)閱讀說明書（以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)）， 確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測定， 過程中問題請您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。