生物化學(xué)測定為了保證測定結(jié)果的準確性,避免時間和材料的損失,正式試驗前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本進行預(yù)測定,并制作標準曲線;根據(jù)預(yù)測定結(jié)果確認是否需要調(diào)整樣本量、提取過程中料液比是否需要調(diào)整、標準線性是否滿足要求等。預(yù)實驗結(jié)果評價過程中的任何問題均可與專屬技術(shù)專員聯(lián)系。
生物化學(xué)測定通常采用玻璃或石英兩種材質(zhì)的比色皿:紫外分光光度法通常使用石英比色皿(口沿處有標有Q),可見分光光度法通常使用玻璃比色皿(口沿處有標有G);按說明書要求使用1mL玻璃/石英比色皿(光徑=1cm)、200μL微量玻璃/石英比色皿(光徑=1cm)、普通/UV微孔板(光徑=0.5cm)。
不同樣品測定值差異不顯著:
1、該指標在不同樣品間確實無差異;
2、操作重復(fù)性不佳,掩蓋了組內(nèi)和組間差異:建議進行重復(fù)試驗,若重復(fù)之間吸光度變化差異較大,表明可能是由于操作不規(guī)范造成的,應(yīng)注意加液體積是否準確和反應(yīng)時間控制是否準確等。
測定管與對照管差異不顯著:
1、首先需確認反應(yīng)是否進行:檢查標準組吸光值是否正常、試劑配制是否正常、提取過程是否正常、試劑添加順序是否正確等;
2、樣本中待測物含量或酶活較低:適當(dāng)增加樣本量或?qū)颖緷饪s后再進行測定;注意:測定酶活時若需要使用滅活酶液,需檢查是否滅活充分,可適當(dāng)延長粗酶液滅活時間或更改粗酶液滅活方式。